如何維護(hù)色譜分離柱的方法有哪些
點(diǎn)擊次數(shù):2163 更新時(shí)間:2018-09-26
色譜分離柱是較經(jīng)典的有機(jī)物分離技術(shù),原理和薄層色譜相同,但裝置有所不同,主要由一個(gè)均勻玻璃柱和填充填料組成,填料是決定柱效的主要因素,填料必須滿足具有不溶于所使用流動(dòng)相、不使欲分離的樣品破壞或分解、惰性大、可逆性強(qiáng)和吸附容量。
如何維護(hù)色譜分離柱
1.加保護(hù)柱(預(yù)柱)是保護(hù)色譜柱的有效辦法。保護(hù)柱是根內(nèi)裝填料與分離柱性質(zhì)相近的短柱,接在分離柱之前,或代替流路過濾器。保護(hù)柱的作用是收集和阻塞分離柱口的化學(xué)垃圾,這些垃圾如果直接進(jìn)入分離柱會(huì)逐漸堆積在柱頭,降低柱效能。保護(hù)柱是消耗品,如分析血漿樣品,一般分析50個(gè)樣品后需更換新柱芯。
2.避免高壓沖擊色譜分離柱。一般色譜柱都能承受得起高壓,但經(jīng)不住突然變化的高壓沖擊,這將改變柱床體積,影響柱效。引起高壓沖擊的原因主要有:進(jìn)樣器的樣品閥的緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)、泵啟動(dòng)太快、柱切換等操作。用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí)的壓力變化不大,自動(dòng)進(jìn)樣閥由于切換較慢,可能會(huì)造成壓力沖擊。
3.合理選擇液相色譜分析柱。我們知道,選擇色譜分離柱主要根據(jù)兩點(diǎn),一是根據(jù)待測(cè)組分的分子量的大小;二是根據(jù)流動(dòng)相條件,包括PH值、離子強(qiáng)度和溶劑極性等。
4.定期沖洗色譜分離柱。每次分析工作結(jié)束時(shí),沖洗完緩沖鹽后,要過度到用強(qiáng)溶劑沖洗柱子,如可用色譜純甲醇、乙腈沖洗反相C18柱,目的是沖去吸附在柱上的強(qiáng)保留組分。如果用甲醇/水為流動(dòng)相也應(yīng)這樣沖洗柱子,在一定程度上可恢復(fù)柱效。