一般說來,機(jī)器剛起動時(shí),基線容易漂移,大概要半個(gè)小時(shí)的平衡時(shí)間,如果,你用了緩沖溶液或緩沖鹽,還有就是在低波長下(220nm)平衡時(shí)間相對會比較長,但是,如果你在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移,則你要考慮下面的原因:
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解決方法:
控制好柱子和流動相的溫度,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
③流通池被污染或有氣體。
解決方法:
用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(最好斷開柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
?、芰鲃酉辔廴?、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。
解決方法:
檢查流動相的組成,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑。
?、輼悠分杏袕?qiáng)保留的物質(zhì)(高K'值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而,表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線。
解決方法:
使用保護(hù)柱,如有必要,在進(jìn)樣之間。在分析過程中,定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
?、迿z測器沒有設(shè)定在最大吸收波長處。
解決方法:
將波長調(diào)整至最大吸收波長處;
?、吡鲃酉嗟膒H值沒有調(diào)節(jié)好。
解決方法:
加適量的酸或堿調(diào)至最佳pH值;
2保留時(shí)間漂移
保留時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志,同一種東西,兩次的保留時(shí)間相差不要超過15s,超過了半分鐘可看做保留時(shí)間漂移,就無法進(jìn)行定性,你要考慮以下原因:
?、贉乜夭划?dāng)。
解決方法:
調(diào)好柱溫,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
?、诹鲃酉啾壤兓?。
解決方法:
檢查四元泵的比例閥是否有故障。
?、凵V柱沒有平衡。
解決方法:
在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。
?、芰魉僮兓?。
解決方法:
重新設(shè)定流速。
?、荼弥杏袣馀?。
解決方法:
從泵中除去氣泡。
3峰型異常問題
峰型問題是液相的主要問題,在做液相過程中,我們就是要變換不同的條件來改善不好的峰型,對于各種各樣的異常峰,要區(qū)別對待,從主要問題出發(fā),一個(gè)一個(gè)加以解決。
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解決方法:
系統(tǒng)未達(dá)到平衡;
溶解樣品的溶劑極性比流動相差很多;
色譜柱尺寸及類型選擇不正確;
色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低;
溫度變化造成的影響。
?、谒龇灞阮A(yù)想的小。
解決方法:
樣品黏度過大;進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差;檢測器設(shè)置不正確,定量環(huán)體積不正確;檢測池污染;檢測器燈出現(xiàn)問題。
?、凵V圖中未出峰。
解決方法:
系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解;
泵未輸液或流動相使用不正確;
檢測器設(shè)置不正確;
針對以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可。
?、芤粋€(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰。
解決方法:
流動相吸收本底高;進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣;樣品組分的吸收低于流動相。
?、菟蟹寰鶠樨?fù)峰。
解決方法:
信號電纜接反或檢測器輸出極性設(shè)置顛倒;
光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。
?、蕹霈F(xiàn)雙峰或肩峰。
解決方法:
進(jìn)樣量過大;樣品濃度過高;
保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞;
保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;
柱塌陷或形成短通道。
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解決方法:
進(jìn)樣量或樣品濃度高;
溶解樣品的溶劑較流動。